Introdução: O 2,4-D (ácido 2,4-diclorofenoxiacético) é um dos herbicidas clorofenoxi mais utilizados em todo o mundo, principalmente nas duas maiores potências mundiais, Estados Unidos e China e também no Brasil, devido ao custo-benefício do produto. Esse agrotóxico é classificado como classe I (altamente tóxico) na ação sistêmica e classe III (produto perigoso ao meio ambiente) para riscos ambientais. Os efeitos tóxicos do 2,4-D incluem carcinogênese, imunotoxicidade, estresse oxidativo e cardiotoxicidade. Avaliar aspectos estruturais da matriz extracelular cardíaca, em especial do colágeno, podem contribuir para uma melhor compreensão dos possíveis efeitos cardiotóxicos. O objetivo desse estudo foi analisar os efeitos da exposição ambiental inalatória crônica do 2,4-D nos aspectos estruturais cardíacos relacionados ao colágeno. Métodos: Foram utilizados 30 ratos Wistar adultos machos (200-250 gramas), divididos em 3 grupos: GC (n=10) grupo controle: exposto à nebulização de 10 ml de solução de cloreto de sódio a 0,9%; GB (n=10) grupo de baixa concentração de 2,4-D: exposto a névoa de herbicida com 3,71×10-3 g de ativo ingrediente por hectare (g.i.a./ha), correspondendo a 187,17 mg/m3 de 2,4-D; GA (n=10) grupo de alta concentração de 2,4-D: exposto à nebulização do herbicida com 9,28×10-3 g.i.a./ha, correspondente a 467,93 mg/m3 de 2,4-D. Após um período de exposição de 180 dias, 5 vezes por semana os ratos foram eutanasiados e parte do ventrículo esquerdo foi utilizado para a confecção das lâminas histológicas coradas com Picrosirius red (PSR) e o colágeno foi quantificado com o software Image J. Para avaliar a normalidade foi utilizado o teste de Shapiro Wilk, para comparação dos dados Kruskall Wallis seguido de Dunn, (p<0,05). Resultados: Houve aumento do colágeno nos animais expostos a baixa dose do 2,4-D (GC= 6,05±0,73, GB= 8,12±1,44 e GA= 4,42±1, p<0,0001). Conclusão: A exposição inalatória crônica ao herbicida 2,4-D glifosato simulando a aplicação ambiental promoveu alterações na quantidade de colágeno do coração dos ratos expostos a uma baixa dose.